Les produits biopharmaceutiques et biothérapeutiques sont des médicaments produits à partir de cellules vivantes. Mais les cellules produisent d’autres protéines (appelées protéines de cellules hôtes ou HCP) qui peuvent contaminer le produit thérapeutique final et causer un certain nombre de problèmes.
Téléchargez cette infographie pour en savoir plus sur :
- Que sont les professionnels de la santé et les problèmes qu’ils posent
- Approches établies pour l’analyse HCP
- Approches d’analyse HCP nouvelles et émergentes
Type de médicament Dose Fréquence d’administration Maladie Cependant, ces cellules fabriquent également d’autres protéines parallèlement au produit thérapeutique souhaité. Celles-ci sont connues sous le nom de protéines de cellules hôtes (HCP). Les HCP sont une source majeure de contamination car ils peuvent persister tout au long du processus de fabrication et contaminer le produit thérapeutique final. Cela peut poser un certain nombre de problèmes : un produit biopharmaceutique doit respecter les niveaux acceptables de HCP exigés par des agences telles que la Food and Drug Agency (FDA) des États-Unis et l’Agence européenne des médicaments (EMA). Le niveau acceptable est généralement évalué au cas par cas et dépend de facteurs tels que : L’analyse HCP n’est généralement pas réalisée à l’aide d’un seul outil, mais de plusieurs méthodes orthogonales. Il existe plusieurs approches couramment utilisées pour la détection, la caractérisation et l’identification des HCP. L’approche de référence et la méthode la plus courante, semi-quantitative et largement acceptée par les agences de réglementation. Déclencher des réponses immunitaires chez les patients Affecter l’efficacité du médicament Réduire la stabilité et la qualité du médicament Les produits biopharmaceutiques et biothérapeutiques (également appelés produits biologiques) sont des médicaments produits à partir de cellules vivantes. Anticorps Vaccins Thérapies cellulaires et géniques Les approches et avancées comprennent : Analyse des protéines de la cellule hôte : gravité de l’analyse HCP Approches pour Une approche orthogonale est une technique différente qui mesure la même propriété en utilisant une méthode différente. Cela permet de confirmer le résultat original et d’éliminer les faux positifs. Exemples Analyse HCP Approches établies pour la méthode ELISA liée aux enzymes : Les anticorps sont immobilisés sur une plaque et les échantillons ajoutés. Les HCP se lient spécifiquement aux anticorps. Les anticorps de détection se lient ensuite, formant un « sandwich » qui peut être utilisé pour quantifier la quantité de protéine présente. SUBSTRAT ANTICORPS SECONDAIRE EXEMPLE DE DÉTECTION ELISA SANDWICH CAPTURE D’ANTICORPS ANTICORPS HCP Avantages et inconvénients : Relativement simple, sensible, bien validé et sélectif. Haut débit, analysant de nombreux échantillons sur une courte période. Ne peut détecter que les HCP qui disposent d’anticorps spécifiques et peut manquer les HCP non reconnus par le mélange d’anticorps. Fournit uniquement des informations sur le total des HCP. Sépare les protéines en fonction du point isoélectrique et du poids moléculaire sur un gel de polyacrylamide pour permettre l’identification des HCP individuels. Recommandé pour caractériser les antigènes HCP et les anticorps anti-HCP. Méthode d’électrophorèse sur gel 2D : caractérise biochimiquement les HCP dans un échantillon en les séparant selon le point isoélectrique (pI) dans une dimension et le poids moléculaire (MW) dans l’autre. pl MW HIGH MW + LOW pl LOW MW + LOW pl HIGH MW + HIGH pl LOW MW + HIGH pl Avantages et inconvénients : La séparation haute résolution permet d’enquêter simultanément sur la population HCP. Permet la caractérisation de protéines intactes. Travail intensif avec un faible débit et une faible reproductibilité. Fournit des données quantitatives limitées et dépend fortement de la technique – doit être combinée avec d’autres techniques. Les approches basées sur la spectrométrie de masse sont les principales techniques émergentes qui gagnent actuellement en popularité. Une méthode plus récente qui est de plus en plus utilisée comme approche orthogonale de l’ELISA. Il est devenu un outil d’analyse HCP clé pour l’identification et la quantification de protéines individuelles. Analyse HCP Technologies émergentes pour les molécules présentes dans un échantillon sont ionisées et décomposées en peptides plus petits. Ils sont généralement séparés par chromatographie liquide (LC) puis analysés par MS, selon leur rapport masse/charge. spectrométrie (LC-MS) Chromatographie liquide-méthode de masse : BIOLOGIQUE AVEC IMPURETÉS HCP FRAGMENTS PEPTIDIQUES LC SÉPARATION DES PEPTIDES ANALYSE MS Avantages et inconvénients : Détection plus complète qui distingue les différents types de HCP. Peut également détecter des protéines en faible abondance que l’ELISA pourrait manquer. Moins haut débit, plus complexe et plus coûteux, nécessitant une expertise technique et du matériel. Plage dynamique limitée, difficile à détecter les protéines en faible abondance. Perspectives futures L’avenir de l’analyse HCP pourrait apporter des analyses améliorées et une clairance HCP ainsi que des changements dans les systèmes d’expression pour réduire l’expression de HCP. L’analyse HCP est essentielle pour la sécurité et l’efficacité des produits biopharmaceutiques, car elle permet de détecter les impuretés susceptibles d’avoir un impact sur la santé des patients. Les méthodes existantes telles que l’ELISA et les approches émergentes telles que la LC-MS peuvent aider les sociétés biopharmaceutiques à établir le profil des professionnels de la santé. À mesure que ces outils continuent d’évoluer et de se développer, cela peut nous aider à produire des thérapies plus sûres et plus efficaces pour les patients. SPONSORITÉ PAR test immunosorbant
#Analyse #des #protéines #des #cellules #hôtes #approches #avancées