2023-05-13 01:27:51
doi : 10.1007/s10529-023-03367-x.
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Affiliations
Développer
Élément dans le presse-papiers
Lettre biotechnologique.
2023.
Abstrait
Avant l’utilisation clinique, une vaste prolifération in vitro de cellules souches adipeuses humaines (ASC) est nécessaire. Parmi les options actuelles, les flacons agités de type spinner, qui utilisent des microporteurs pour augmenter le rendement des cellules adhérentes, sont recommandés. Ici, nous proposons une méthodologie pour la prolifération des ASC par culture en suspension cellulaire à l’aide de Cultispher-S® microsupports (MC) sous agitation dans un spinner flask, dans le but d’établir un système qui concilie l’efficacité du rendement cellulaire avec une haute viabilité de la culture lors de deux phases distinctes : l’ensemencement et la prolifération. Les résultats ont montré que l’adhésion cellulaire était potentialisée sous agitation intermittente à 70 tr/min en présence de 10 % de FBS pour une concentration cellulaire initiale de 2,4 × 104 cellules/mL dans les 24 premières heures de culture. Dans la phase de prolifération, l’analyse cinétique a montré que la croissance cellulaire était plus élevée sous agitation continue à 50 tr/min avec un régime de renouvellement du milieu de culture de 50 % toutes les 72 h, ce qui était suffisant pour maintenir la culture à des niveaux optimaux de nutriments et de métabolites jusqu’à neuf jours de culture, ce qui représente une multiplication par 11,1 et une productivité cellulaire maximale de 422 cellules/mL/h (1,0 × 105 cellules viables/mL). Les ASC ont maintenu les caractéristiques immunophénotypiques et le potentiel de différenciation mésodermique des deux lignées cellulaires de différents donneurs. Le protocole établi représente une méthode plus efficace et rentable pour obtenir un taux de prolifération élevé d’ASC dans un système à base de microporteurs, ce qui est nécessaire pour une utilisation à grande échelle en thérapie cellulaire, soulignant que la manipulation des paramètres critiques optimise la production d’ASC. processus.
Mots clés:
Tissu adipeux; Proliferation cellulaire; microporteur Cultispher-S® ; Cellules stromales souches mésenchymateuses humaines ; Analyse cinétique ; Flacon spinner ; Culture en suspension.
© 2023. Le(s) Auteur(s), sous licence exclusive de Springer Nature BV
Les références
Bydlowski SP, Debes AA, Maselli LMF, Janz FL (2009) Caractéristiques biologiques des cellules souches mésenchymateuses. Journal brésilien d’hématologie et d’hémothérapie2 31:25–35 –
EST CE QUE JE
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