Des chercheurs ont mis au point un test hautement sélectif et sensible pour détecter la neuropiline-2 (NRP2), la cible protéique thérapeutique de efzofitimodun traitement expérimental pour sarcoïdose pulmonaire par aTyr Pharma.
À l’aide de méthodes de détection immunohistochimiques (IHC), le nouvel outil à base d’anticorps – créé en collaboration avec Michael Muders, à l’hôpital universitaire de Bonn, en Allemagne – fera la lumière sur la façon dont l’expression (production) de NRP2 est liée à la sarcoïdose pulmonaire et pourrait potentiellement être un biomarqueur pour classer et suivre les patients.
“Cet anticorps unique développé par l’équipe de recherche aTyr et optimisé pour l’IHC en collaboration avec le laboratoire Muders fournit une méthode de détection hautement spécifique et sensible pour NRP2 qui facilitera la caractérisation du récepteur cible de l’efzofitimod dans les échantillons de tissus des patients”, Leslie Nangle, PhD , vice-président de aTyr Pharmadit dans un communiqué de presse. “Cela peut fournir un outil clinique extrêmement utile, aidant potentiellement à la sélection ou à la stratification des patients, permettant ainsi une compréhension réfléchie de l’expression de NRP2 en ce qui concerne les états pathologiques pertinents.”
La sarcoïdose pulmonaire est marquée par la formation de granulomes, de petits amas de cellules inflammatoires qui déclenchent l’inflammation, dans les poumons. Au cours de l’inflammation, les niveaux de NRP2 sont élevés dans les cellules immunitaires, y compris celles des granulomes. En modulant l’activité NRP2, l’efzofitimod cherche à atténuer les réponses immunitaires associées à l’inflammation pulmonaire.
Les données d’un Étude de phase 1/2 (NCT03824392) ont démontré que l’efzofitimod était généralement bien toléré et amélioration de la fonction pulmonaire par rapport à un placebo.
Récemment, aTyr annoncé plans pour EFZO-FIT, un Essai clinique de phase 3 (NCT05415137) qui vise à recruter 264 adultes atteints de sarcoïdose pulmonaire, âgés de 18 à 75 ans. L’objectif de l’étude est de déterminer si l’efzofitimod peut réduire l’utilisation des glucocorticoïdes, qui peuvent entraîner des effets secondaires nocifs à long terme.
La détection IHC est largement utilisée pour identifier et localiser des protéines spécifiques dans des échantillons de tissus de patients. Il repose sur la création d’un anticorps hautement sélectif vis-à-vis de sa cible protéique, qui peut ensuite être coloré et visualisé.
Cependant, la disponibilité de réactifs pour la détection IHC de la protéine NRP2 dans les tissus est limitée et les anticorps anti-NRP2 disponibles dans le commerce ont tendance à montrer une faible sélectivité, conduisant à la coloration de protéines autres que NRP2.
aTyr a présenté le développement du nouveau test dans une affiche au Congrès international 2022 de la Société respiratoire européenne (ERS). L’affiche, “Un nouvel anticorps neuropiline-2 (NRP2) pour la coloration immunohistochimique d’échantillons de tissus de patients», peut également être consulté sur le site Web de l’entreprise.
L’équipe de recherche a d’abord généré un panel d’anticorps anti-NRP2 en immunisant des souris. Un anticorps, appelé aNRP2-36v2, a été choisi pour des tests supplémentaires en raison de sa sélectivité élevée et de sa forte liaison NRP2.
Les tests ont confirmé que l’aNRP2-36v2 était lié à la NRP2 humaine, reconnaissait deux formes de la protéine appelées NRP2a et NRP2b et n’avait pas de réaction croisée avec la NRP1 humaine ou la NRP2 de souris, de rats ou de singes. L’équipe a également identifié l’emplacement spécifique où l’anticorps se lie à NRP2.
En utilisant la détection IHC, aNRP2-36v2 a montré une coloration forte et spécifique des cellules qui produisent NRP2, mais pas de celles sans la protéine.
Un anticorps anti-NRP2 commercial était également moins spécifique que l’aNRP2-36v2 et une absence de liaison à NRP1 a été confirmée par une absence de coloration des cellules produisant cette protéine. La spécificité a été démontrée par l’absence de coloration aNRP2-36v2 après l’ajout d’un excès de protéine NRP2 ou la réduction de l’expression de NRP2 dans les tissus.
Enfin, la coloration IHC des tissus de patients atteints de sarcoïdose à partir de biopsies cutanées et pulmonaires a montré des niveaux élevés de production de NRP2 dans les granulomes, mais pas dans les tissus environnants. Des tests ont également montré que des granulomes principalement composés de cellules macrophages immunitaires expriment également NRP2. Cet anticorps convenait à la co-coloration avec d’autres anticorps ciblant différentes protéines.
“Nous utilisons cet anticorps pour mieux comprendre la biologie des cellules immunitaires clés qui composent ces structures de granulome sarcoïde et espérons qu’il pourra conduire à l’identification de biomarqueurs de la sarcoïdose et d’autres indications dans lesquelles NRP2 joue un rôle”, ont conclu les chercheurs.
