La fièvre catarrhale est une maladie virale infectieuse qui touche les ruminants, provoquée par un arbovirus (famille Sédoréoviridésgenre Orbivirus) qui se transmet par la piqûre de moustiques du genre Culicoïdes infecté par le virus. De nombreuses espèces de virus du genre Orbivirus Ils provoquent de graves maladies chez les mammifères. Cependant, trois arbovirus transmis par Culicoides ont retenu davantage l’attention en raison de leur impact considérable non seulement sur la santé animale, mais aussi parce qu’ils entraînent de lourdes pertes économiques pour les éleveurs et nécessitent une déclaration obligatoire : virus de la fièvre catarrhale (BTV), Virus de la peste équine (AHSV) et virus de la maladie hémorragique épizootique (EHDV). En 2023, de nouveaux foyers de fièvre catarrhale des sérotypes 3 et 8 ont été signalés en Europe, en plus des cas de sérotype 4 dans la péninsule ibérique. Des épidémies d’EHDV-8, un virus contre lequel il n’existe aucun vaccin homologué en Europe, ont récemment été signalées pour la première fois en Europe.
Une équipe co-dirigée par les Drs. Javier Ortego oui Aitor Nogales au Centre de Recherche en Santé Animale (CISA) de l’INIA-CSIC, a généré des virus recombinants de la langue bleue (rBTV) qui expriment des protéines fluorescentes ou luminescentes qui permettent tracer l’infection par le BTV dans les cultures cellulaires et les infections expérimentales chez les animaux. L’utilisation de ces virus dotés d’une capacité de réplication exprimant une protéine fluorescente ou bioluminescente a contribué de manière significative à l’étude. in vitro e vivant des infections virales et le développement de nouvelles approches thérapeutiques.
« Malgré la disponibilité de vaccins, le BTV et d’autres orbivirus apparentés ont toujours un impact significatif sur la santé animale et ont d’importantes conséquences économiques dans le monde entier. Ces études contribueront à l’avancement de la recherche sur les orbivirus et faciliter le développement rapide de nouveaux traitements, y compris des vaccins, contre ces virus », explique Javier Ortego.
En utilisant la génétique inverse, les chercheurs ont conçu et sauvé des rBTV des sérotypes 1, 4 et 8 qui expriment la protéine NanoLuc luciférase (NLuc) ou la protéine fluorescente Vénus. “Cela signifie que le signal fluorescent ou luminescent n’est détecté que si la réplication du virus se produit et que des protéines non structurales sont exprimées», précise Ortego.
La cinétique de croissance des virus rBTV/NLuc et rBTV/Venus dans les cultures cellulaires a montré des taux de réplication similaires à ceux du virus sauvage. Les études d’infectivité de ces virus recombinants dans des modèles murins sensibles à l’infection par les orbivirus ont montré que les virus exprimant les gènes rapporteurs sont atténués. vivant. Fait intéressant, l’activité luciférase a été détectée dans le plasma de souris virémiques infectées par rBTV/NLuc, le signal luminescent étant quantitativement lié aux niveaux d’ARN viral dans le sang des souris infectées tout au long de l’infection. Cette caractéristique a permis d’utiliser rBTV-8/NLuc pour étudier l’efficacité d’un vaccin commercial contre le BTV-8.
DÉTECTION RAPIDE ET PRÉCISE DU VIRUS DANS LE SANG
L’analyse de la réplication virale par RT-qPCR ou d’autres tests conventionnels est laborieuse et coûteuse, ou comme dans le cas de l’isolement du virus, elle prend souvent plusieurs jours. “La possibilité de quantifier la bioluminescence directement à partir d’échantillons de sang et de pouvoir la corréler avec les niveaux de virémie des animaux évite les étapes fastidieuses de manipulation des échantillons. Cela permet de déterminer détection rapide et précise de la présence du virus dans le sangce qui facilite l’évaluation de l’efficacité et de la puissance de nouveaux vaccins contre le virus de la fièvre catarrhale », ajoute Aitor Nogales.
Enfin, ces virus recombinants exprimant la luciférase NLuc ont permis pour la première fois d’étudier la dynamique de l’infection virale chez un même animal au cours de sa progression naturelle grâce à des systèmes d’imagerie. vivant non invasif (technologie IVIS). « Les études décrites dans ce emploi sera génial utilité pour évaluer le pouvoir pathogène de ces orbivirus d’une grande importance pour la santé animale et contribuera au développement de nouvelles alternatives thérapeutiques, telles que de nouveaux vaccins ou antiviraux », conclut Javier Ortego.
2024-02-22 13:22:10
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