2024-03-22 13:02:29
Par Luisa Torres, PhD, illustré par Ashley Campsall
Une meilleure façon de sélectionner des anticorps prometteurs
Les scientifiques développent des anticorps monoclonaux hautement spécifiques en sélectionnant des centaines de candidats pour identifier ceux qui se lient fortement et précisément aux antigènes cibles. Traditionnellement, les scientifiques utilisaient des tests biochimiques tels que le test immuno-enzymatique pour le dépistage des anticorps, mais la cytométrie en flux a rendu cette opération autrefois longue et processus fastidieux plus facile et plus efficace (1). Le tri cellulaire activé par fluorescence (FACS), une forme avancée de cytométrie en flux, est une technologie puissante qui aide les chercheurs à passer au crible divers populations cellulaires pour isoler les cellules produisant les anticorps les plus puissants (2). Aujourd’hui, FACS joue un rôle crucial dans le développement d’anticorps thérapeutiques, avec plus de 100 anticorps approuvé pour les thérapies humaines, plus au moins 140 autres en stade avancé développement (3,4).
Fusionner des cellules pour une production illimitée d’anticorps
Le processus de génération d’anticorps commence par des hybridomes, des cellules générées par la fusion de cellules de myélome immortalisées avec des cellules B productrices d’anticorps dérivées d’animaux immunisés contre l’antigène d’intérêt ou d’humains guéris d’une maladie (2). Les cellules d’hybridome stables produisent des quantités illimitées de lié à la membrane et des anticorps solubles qui reconnaissent le même antigène unique (5).
Identifier les anticorps les plus puissants à l’aide de tags fluorescents
Les scientifiques marquent l’antigène cible en solution avec des étiquettes fluorescentes et l’introduisent dans des cellules d’hybridome en culture pour trouver le cellules d’hybridome avec des anticorps qui se lient fortement et spécifiquement à l’antigène cible (6).
Trier les cellules par force de fluorescence
Les scientifiques analysent ensuite les signaux fluorescents des cellules d’hybridome lorsqu’elles traversent un faisceau laser pendant le FACS. Les cellules exprimant des anticorps qui se lient à l’antigène fluorescent émettent une fluorescence plus intense que les cellules ayant une liaison faible ou inexistante à l’antigène (6).
Une source continue d’anticorps solubles
Les scientifiques peuvent ensuite récolter le milieu de culture, extraire les anticorps solubles, les purifier et les valider à des fins thérapeutiques, notamment pour la maladie. diagnostic ou immunothérapie (6,7,8).
Cellules en expansion exprimant les bons anticorps
Ensuite, les scientifiques collectent et développent les cellules exprimant les anticorps ayant la plus forte affinité de liaison pour l’antigène. Cela génère une population homogène de cellules produisant les anticorps les plus puissants.
Les références
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